Odběr biologického materiálu

Zdroje variability před odběrem

• Neovlivnitelné
1. Cyklické variace - opakující se jevy, které způsobují změny vyšetřovaných komponent (např. menstruační cyklus).
2. Pohlaví, rasa, věk – rozdíly jsou dány hlavně hormonálním vybavením a habitem (především svalová hmota u mužů způsobuje rozdíly svalových ukazatelů).
3. Zralost jaterního parenchymu (u krevního srážení mají jiné výsledky novorozenci) a změny koagulační rovnováhy (změna D-dimerů ve vyšším věku – zvažuje se změna fyz.mezí v závislosti na věku).
4. Gravidita.
• Ovlivnitelné

1. Fyzická zátěž.

2. Vliv diety.

3. Vliv léků.

4. Nadmořská výška.

5. Mechanické trauma.

6. Stres.

Zdroje variability při odběru

• Načasování odběru krve (např. při monitorování farmakoterapie).
• Poloha při odběru (pro zajištění standardních podmínek odběru krve z loketní žíly je vhodné pro stanovení většiny analytů zajistit polohu vsedě po dobu 15 minut před odběrem).
• Výběr místa odběru krve – nevhodná je paže se zavedenou infuzí, místo s hematomem, velkými jizvami a strana na které byla provedena mastektomie (lymfostáza).
• Použití turniketu (Esmarch) - přiložení turniketu nad místem vpichu sice usnadní odběr venózní krve dilatací žíly, ale vede k ovlivnění kvality vzorku. Již po 1 minutě se do intersticia přesune významné množství vody s ionty a výsledkem je zvýšení početní koncentrace elementů, zvýšení koncentrace proteinů a látek na buňky a proteiny vázaných. Dále přiložení turniketu způsobí změnu hemostázy: uvolnění tkáňového faktoru a aktivaci hemostázy. Pokud je vůbec nutné Turniket používat neměla by doba jeho naložení přesáhnout 15 sec. – v žádném případě však 1 minutu. Je-li turniket naložen před odběrem za účelem volby místa vpichu, lze ho pro vlastní odběr použít nejméně po dvou minutách uvolnění.
• Vliv cvičení paží při naloženém turniketu – vede ke zvýšení draselného kationu v plazmě – cvičení („pumpování“) se při odběru nedoporučuje.
• Vliv lokálního metabolismu – hypoxie paže (lokální změna metabolismu např. při prochladnutí končetiny nebo poruše oběhu). Pokud se provádí odběr kapilární krve na pH a krevní plyny z prstu, je vhodné paži prohřát (zabalením do teplé látky).
• Hemolýza – je jednou z nejčastějších příčin ovlivnění výsledku laboratorních vyšetření – dojde k uvolnění látek z hemolyzovaných erytrocytů, také může vadit změna zbarvení plazmy. Příčinou může být: znečištění jehly desinfekčním prostředkem, použití příliš úzké jehly, prudké třepání krve ve zkumavce, uskladnění plné krve v lednici, pozdní dodání vzorku do laboratoře, použití nesprávné koncentrace protisrážlivého činidla.
• Volba protisrážlivých činidel – chybou je volba nesprávného protisrážlivého činidla nebo nedodržení poměru mezi materiálem a protisrážlivým činidlem.
• Kontaminace dezinfekcí – při odběru kapilární krve na pH a při odběru venózní krve (může způsobit nežádoucí hemolýzu).
• Kontaminace intersticiální tekutinou - při kapilárním odběru punkcí kůže.
• Kontaminace infuzí – kontaminace (zředění vzorku) aplikovanou infuzí, ale také zředění vzorku nepatinovým zámkem katetru (i po jeho odstranění je ovlivněno vyšetření koagulace) – jediné správné vyšetření je odběr krve z opačné končetiny.

Zdroje variability mezi odběrem a analýzou

• Vliv srážení – i jen částečně vysrážený vzorek (špatný poměr protisrážlivých činidel, aktivace koagulace) zkresluje až znemožňuje vyšetření parametrů krevního obrazu včetně diferenciálního rozpočtu a vyšetření koagulačního (krevního srážení).
• Vliv konzervačních látek – interference s analytickou metodou apod.
• Vliv gelových separátorů - Nenaplněné zkumavky se separačními gely by se měly skladovat při teplotě 20-25 °C, protože nižší teplota poškozuje migrační vlastnosti gelu a příliš vysoká teplota gel dekomponuje. Již jednou centrifugovaný vzorek ve zkumavce s gelem se nesmí znovu centrifugovat, protože by se smísilo sérum pod gelem (které bylo v kontaktu s krevními elementy) se sérem nad gelem. Skladování vzorků ve zkumavkách s gelem je možné 2-3 dny bez kontaminace séra celulárními komponentami (týká se hlavně biochemických a imunologických parametrů).
• Vliv materiálu odběrové nádobky
• Vliv separace elementů - způsob vhodné centrifugace se u různých vyšetřovacích metod liší. Obecně platí, že u vyšetřovacích metod, které potřebují k vyšetření sérum nebo plazmu je oddělení od krevních elementů důležité a čím dříve tím lépe (zabránění nežádoucí hemolýzy a uvolnění látek z celulárních komponent) – u koagulačních vyšetření, která jsou jedna z nejcitlivějších je to 1-2 hod., u většiny ostatních metod také do 2 hodin.
• Ostatní vlivy – skladování, vliv teploty, slunečního světla, vliv transportu, změna analytů v čase, vliv chladových a tepelných protilátek (změna vlastností krevních elementů) a další.

POZOR - Před odběrem proveďte ověření totožnosti pacienta aktivním dotazem na jméno příjmení rok narození a event. RČ, a ověření, že splnil požadavky pro vyšetření tj. např. že je nalačno je-li to potřeba, a nebo že si vzal léky v daném čase…apod.

	Pořadí odběrových zkumavek v odběrové místnosti
1. Biochemie
2. Hematologie
3. Koagulace
4. Mikrobiologie
5. Krevní skupina
6. FW